紫杉醇混合胶束细胞生物学特性及转运机制研究

紫杉醇为广泛应用的化疗药。但其水中溶解度极低，约为1 mg∙L-1。目前紫杉醇在临床上最主要的制剂“紫杉醇注射液” （PIC）含有Cremophor EL，会引起组胺释放，产生急性过敏反应，严重时可致死。为解决此问题，我们研制出一种稳定性较高的紫杉醇混合纳米胶束（PMM）制剂。混合胶束系统（Mixed micelles system）在国外应用广泛，而国内研究较少。该系统不仅可以提高难溶性药物的溶解度，还可提高药物疗效，是一种生物相容性载体。 本文中制备PMM并乳化后利用激光散射粒度仪测定其粒径大小，选定了有效粒径为33 nm及112.5 nm的制剂进行实验。MTT实验结果表明PMM对HeLa细胞增殖的抑制作用高于PIC，且在浓度≥10 mg∙L-1时具有显著性差异（P<0.05）。光镜及Hoechst33342染色结果表明，PMM及PIC都可引起细胞凋亡。流式细胞仪检测细胞周期结果表明，PMM和PIC实验组细胞主要产生G2/M期阻滞，当作用时间为48 hr后出现了明显的亚G1凋亡峰，且PMM的促调亡作用较PIC具有增强的趋势。 为进一步优化该制剂，靶向癌细胞，我们正研制EGF偶联的纳米粒。其内吞及转运途径研究很少。而前人研究表明Varp这种新发现的蛋白与胞吞相关。因此本文考察了Varp与EGF及EGF-EGFR复合体的相互作用；免疫荧光染色显示Varp与EGF及EGF-EGFR存在共定位和相互作用；免疫印记结果表明Varp在EGF的刺激2 hr及3 hr下可显著降低EGFR的表达量。这为进一步研究EGF偶联的纳米粒的转运途径奠定了初步基础。